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　　測細菌對抗菌藥物敏感性的試驗簡稱藥敏試驗。用藥敏實驗進行藥物敏感度的測定，可以準確有效的利用藥物進行治療，減少治療錯誤，降低經(jīng)濟損失。目前，實驗室進行藥敏試驗的方法主要有擴散法(紙片擴散法和瓊脂擴散法)，稀釋法(包括瓊脂和肉湯稀釋法)，抗生素濃度梯度法(E-test法)等等。我們現(xiàn)在用的是第一種方法，具體步驟如下所示：

　　一、實驗材料

　　普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(自制)：瓊脂、蒸餾水、待測抗生素

　　細菌：帶做藥敏試驗的細菌(一般為病畜心臟、肝臟、肺等)

　　儀器：三角瓶、牛津杯、刻度吸管、滴頭、培養(yǎng)皿、天平、高壓蒸汽滅菌器、鑷子、游標卡尺等

　　二、實驗準備

　　菌液的制備：將病料用滅好菌的剪刀剪碎，再倒入適量(病料量1-2倍)蒸餾水，混勻，過濾即得。

　　藥液的制備(原料藥)：將要做的若干種抗生素與水按照0.01g:10ml的比例配制。例如：精取10mg慶大霉素放入試管再加入10ml的水混勻。此稀釋液即為用于做藥敏試驗的藥液。

　　將瓊脂與水按照標示量與水混勻后，配制兩份，再在高壓蒸汽滅菌器中滅菌121.C15分鐘，備用。

　　將培養(yǎng)皿、鑷子、刻度吸管、三角瓶干熱滅菌4小時160.C。

　　三、實驗操作方法(牛津杯法)

　　1.培養(yǎng)基的制備：(1)上層：在“超凈臺”中，先將一份配置好的瓊脂均勻的倒入培養(yǎng)皿中，每個培養(yǎng)皿20ml左右。(2)下層：將菌液倒入另一份瓊脂(要求溫度為40.C左右)，混勻，待前一份凝固后將其均勻地倒入培養(yǎng)皿中，每個培養(yǎng)皿5-6ml，凝固即得。

　　2.以無菌操作將滅菌的不銹鋼小管，放置在培養(yǎng)基上，使其與培養(yǎng)基接觸無空隙，并在小管處標記各種藥物名稱。每個培養(yǎng)皿可放4-6支小管。待分鐘后，分別向各小管中滴加配制好的藥液，液面與鋼管平行。置37.C培養(yǎng)14-18小時，觀察結果。

　　四、結果觀察

　　先將鋼管小心地用鑷子取出，會看到在涂有細菌的培養(yǎng)基上，抗菌藥物在瓊脂內(nèi)向四周擴散，因此在小管周圍一定距離內(nèi)的細菌生長受到抑制。過夜培養(yǎng)后形成一個抑菌圈，抑菌圈越大，說明該菌對此藥敏感性越大，反之越小，若無抑菌圈，則說明該菌對此藥具有耐藥性。其直徑大小與藥物濃度，細菌濃度有關系。